实验一：紫外■可见吸收光谱
实验目的
1-熟悉和掌握紫外■可见吸收光谱的使用方法
用紫外■可见吸收光谱测定某一位置样品浓度
定性判断和分析溶液中所含物质种类实验原理
紫外吸收光谱的波长范围在 200-400，可见光吸收光谱的波长在
400?800,两者都属于电子能谱，两者都可以用朗伯比^（Lamber-Beer-Law）定律来描述
A=￡ be
其中A为吸光度；￡为光被吸收的比例系数；c为吸光物质的浓度，单位mol/L；
b为吸收层厚度，单位cm有机化合物的紫外■可见吸收光谱，是其分子中外层价电子跃
迁的结果，其中包括有形成单键的 幫 c电子、有形成双键的n电子、有C* 未成键的孤对n电子。夕卜层电子吸x 收紫外或者可见辐射后，就从基态r 向激发态（反键轨道）跃迁。主要有 四种跃迁，所需能量圧大小顺序 为 nf >nAn*
0
吸收带
特征
典型幕团
efe *
主要发生在远紫外区
c-c、C-H （在紫外光区观测不到）
跃迁一般发生在150-250nm，因此在紫
nfc*
外区不易观察到
?OH、?NH 2、-X、-S
跃迁吸收带波长较长，孤立跃迁一般发
nfn*
生在200nm左右
芳香环
nfn *
跃迁一般发生在近紫外区（200~400nm ）
C=O、C=s x —k N=O ? 一 N=N —
、C=N ;
三、实验步骤
1、开机
打开紫外■可见分光光度计开矢f开电脑f软件f联接fM （光谱方法）进行调节实验需要
的参数：波长范围 700-365nm
扫描速度高速；采样间隔：0.5 nm
2、甲基紫的测定
（1）校准基线
将空白样品（水）放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准
（2）标准曲线的测定
分别将5ug/ml、10ug/ml、15ug/ml、20ug/ml甲基紫溶液移入比色皿（大
约23处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存
测定试样
将试样甲基紫溶液移入比色皿(大约23处)，放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫 描，保存
3、甲基红的测定
校准基线
将空白样品(乙醇)放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准
测定试样
将试样甲基紫溶液移入比色皿(大约23处)，放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫 描，保存
四、实验结果
1 ?未知浓度的测定
分别测定了 5卩g/ml，10卩g/ml，15卩g/ml，20卩g/ml和未知浓度的甲基紫溶液的 紫外吸收光谱，紫外吸收谱图如下：
甲基紫在580nm是达到最大吸收见下表:
浓度/卩g*ml1
吸光度
5
0.665
10
1.274
15
2.048
20
2.659
未知
0.732
各浓度在580nm的吸光度
吸 光 度数据做成散点，结果显示，能很好的拟合直线如下图:
吸 光 度
由计算机计算的拟合直线的尖系为A = 0.135c-0.027
故带入未知浓度的甲基紫溶液的吸光度 0.732得浓度为5.622卩g/ml1 2化合物的定性分
析
已知甲基橙和甲基紫的结构式如下图所示：
NNaO3S屮基橙nh2*
N
NaO3S
屮基橙
nh2*
甲基红
从图中可知，甲基紫约在580nm左右达到吸光度的最大值，而甲基橙溶液在410那么时达到 吸光度最大值，这是由于甲基紫和甲基橙的结构不同造成的，由于甲基紫结构高度共觇，形 成大n键，故最强吸收峰要的波长要比甲基橙的大（红移），同时由于高度共馳，吸光强度也 有所增强。【下载本文档，可以自由复
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